電泳帶型分析
那么下面上海嘉鵬科技有限公司為大家簡(jiǎn)單介紹一下關(guān)于電泳帶型分析：
DNA電泳需要進(jìn)行帶型分析，在實(shí)驗(yàn)過程中常會(huì)發(fā)現(xiàn)所得的帶型出現(xiàn)在這樣那樣的問題。在此，我們對(duì)DNA帶型做了相應(yīng)的分析。
|
帶型 |
原因分析 |
解決辦法 |
|
弱帶或無帶 |
上樣的DNA量不夠 |
增加DNA的上樣量，聚丙烯酰胺凝膠電泳比瓊脂糖電泳靈敏度稍高 |
|
DNA降解 |
避免DNA的核酸酶污染 |
|
|
電泳時(shí)間過長(zhǎng)，DNA跑出 |
減短電泳時(shí)間，降低電壓，增強(qiáng)凝膠濃度 |
|
|
EB染色的DNA，紫外光源不合適 |
應(yīng)用短波長(zhǎng)（254nm），增強(qiáng)紫外燈靈敏度 |
|
|
DNA帶缺失 |
小DNA帶走出凝膠 |
減短電泳時(shí)間，降低電壓，增強(qiáng)凝膠濃度 |
|
分子大小相近的DNA帶不易分辨 |
增加電泳時(shí)間，核準(zhǔn)正確的凝膠濃度 |
|
|
DNA 變性 |
電泳前請(qǐng)勿高溫加熱DNA鏈，以20mM NaCl Buffer稀釋DNA |
|
|
巨大DNA鏈，凝膠電泳不合適 |
在脈沖凝膠電泳上分析 |
|
|
DNA帶模糊 |
DNA降解 |
避免核酸酶污染 |
|
DNA上樣量過多 |
減少凝膠中DNA上樣量 |
|
|
所用電泳條件不合適 |
電泳時(shí)電壓不應(yīng)超過20V/cm，溫度＜30℃,巨大DNA鏈，溫度應(yīng)＜15℃，核查所用電泳緩沖液是否有足夠的緩沖能力 |
|
|
DNA樣含鹽過高 |
電泳前通過乙醇沉淀去除過多的鹽 |
|
|
有蛋白污染 |
電泳前酚抽提去除蛋白 |
|
|
DNA變性 |
電泳前勿加熱，用20mM NaCl緩沖液稀釋DNA |
|
|
不規(guī)則DNA帶遷移 |
對(duì)于λ/Hind III片段COS位點(diǎn)復(fù)性 |
電泳前加熱DNA 65℃加熱5-10分鐘，然后在冰上冷卻5分鐘 |
|
電泳條件不合適 |
電泳電壓不超過20V/cm，溫度＜30℃，電泳緩沖液有足夠的緩沖能力 |
|
|
DNA變性 |
以20mM NaCl Buffer稀釋DNA，電泳前勿加熱 |
以上就是上海嘉鵬科技有限公司為大家整理總結(jié)關(guān)于電泳帶型分析。
我們上海嘉鵬科技有限公司是專業(yè)生產(chǎn)超微量核酸蛋白測(cè)定儀、化學(xué)發(fā)光成像系統(tǒng)、凝膠成像分析系統(tǒng)、紫外分析儀、核酸蛋白檢測(cè)儀、紫外檢測(cè)儀、蛋白質(zhì)分離純化系統(tǒng)、光化學(xué)反應(yīng)儀、旋渦混合器、恒流泵、自動(dòng)部分收集器等十幾個(gè)系列產(chǎn)品的廠家，歡迎大家前來訂購(gòu)